аЯрЁБс>ўџ ,.ўџџџ+џџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџьЅС5@ №ПЅ bjbjЯ2Я2 8­X­XЅџџџџџџˆ~~~~~~~’кккк ц’ Ж›$в R$ ŠС~{{{С~~ж999{F~~›9{›99O~~Oњ АьМ ХкС.O›ь0 OЎ я@Ў O’’~~~~Ў ~OL>D,9p$”чСС’’Є6Є/ ’’691жБВЅ Molecular Genetic Facility February 2005 Sexing Pied Flycatchers (Ficeduka hypoleuca) By Nicola Goodship (Cardiff University) DNA was extracted with ammonium acetate and a 1 in 20 dilution was used in the PCR with 2.0 MgCl2. The protocol used was Griffiths et al. 1998 with the P2/P8 primers. The PCR reaction profile had to be adopted for this species. 94C for 2 minutes followed by 40 cycles of: 94C for 45seconds 56.5C for 45 seconds 72C for 45 seconds followed by 72C for 5 minutes followed by 4C soak Program is on the Tetrad 2 PCR machine, under main file called “P2P8-45s” PCR products (female and male specific bands) could be resolved on 2% agarose gels stained with ethidium bromide. Note With the referenced (Griffiths et al. 1998) lower annealing temperature of 48C, the second amplified band which should be present in females failed to amplify clearly making it impossible to sex-type individuals. 3L^`‡ˆщъь  я ѕ Є Ѕ ќєъєтктЮУтЗтЗтУh bh b6mH sH h bh bmH sH h bh bH*mH sH hЇgmH sH h bmH sH h bh b56h bh b5h b%3`ˆ‰ьэ1 2 o p ‚ ƒ  Џ Ф з и і U V Ш Щ Ъ Я а њњњјјѓјјјјјјјјјјјјјјјјјјјјјјgd bgd bЅ ўа Ѕ §6&P 1F:pМgnАƒ. АШA!Аn"Аn#n$n%ААХАХ Фœ@@ёџ@ NormalCJ_HaJmH sH tH DA@ђџЁD Default Paragraph FontRi@ѓџГR  Table Normalі4ж l4жaі (k@єџС(No ListJ^`ђJ  b Normal (Web)ЄdЄd[$\$mH sH Ѕџџџџ%3`ˆ‰ьэ12op‚ƒЏФзиі  UVШЩЪЯаЇ˜0€€0˜0€€˜0€€p˜0€€˜0€€˜0€€˜0€€˜0€€˜0€€p˜0€€˜0€€˜0€€˜0€€p˜0€€˜0€€˜0€€p˜0€€ €˜0€€ˆ˜0€€ˆ˜0€€ €˜0€€ˆ˜0€€ €˜0€€˜0€€ €˜0€€ €˜0€€˜0€€ €˜0€€˜0€€`ˆ‰ьЇO90M90€M90€€O90ьЁЅ а Ѕ  Ѕ џџЉЈЬтЊЈ\ ЋЈTиЌЈдЗtt|Ї {††Ї=*€urn:schemas-microsoft-com:office:smarttags €PlaceType€=*€urn:schemas-microsoft-com:office:smarttags €PlaceName€9*€urn:schemas-microsoft-com:office:smarttags€place€ LTU^jrœЃЖОЇƒ‹иріўЇ333pƒиіЩЪЯЇЇџџbo1dad х 7{ЇgŽECWHi&] bМgnјtЎFƒ=†aбi~ёCјџ@€ЩЩlцЌЩЩЅP@џџUnknownџџџџџџџџџџџџG‡z €џTimes New Roman5€Symbol3& ‡z €џArial"qŒ№аh…Œ’†’Œ’† ‹‹!№nnxЃ‚‚24ЄЄ3ƒ№H)№џ?фџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџaбџџ$Sheffield Molecular Genetic Facilitybo1dadbo1dadўџр…ŸђљOhЋ‘+'Гй0Œ˜Шдф№ќ , H T `lt|„ф%91жБВЅ Molecular Genetic Facilitysofhefbo1dadlo1do1d Normal.dotobo1dadd11dMicrosoft Word 10.0@Žъа@n,2Х@ќХ‹ўџеЭеœ.“—+,љЎ0  hp|„Œ” œЄЌД М эфUOSЄA %91жБВЅ Molecular Genetic Facility Title ўџџџ ўџџџўџџџ !"ўџџџ$%&'()*ўџџџ§џџџ-ўџџџўџџџўџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџRoot Entryџџџџџџџџ РF ЇС Х/€Data џџџџџџџџџџџџ 1TableџџџџWordDocumentџџџџ8SummaryInformation(џџџџџџџџџџџџDocumentSummaryInformation8џџџџџџџџ#CompObjџџџџџџџџџџџџjџџџџџџџџџџџџўџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџўџ џџџџ РFMicrosoft Word Document MSWordDocWord.Document.8є9Вq